細胞毒性檢測是生物相容性測試的一種，檢測藥物或者新型材料在生物環境中的毒性情況，即通過檢測材料或者藥物對細胞的增殖或者生長的影響，來評價藥物或材料的毒性或者活性，主要用于藥物活性篩選、細胞增殖/毒性測定、抗腫瘤藥效計算IC50等;常用MTT法或者CCK8法檢測，另外也可以通過Live/dead雙染法進行細胞成像，更直觀的記錄細胞的存活情況。

　　細胞增殖及毒性檢測實驗原理

　　1.CCK-8測試

　　CCK-8試劑(Cell Counting Kit-8 細胞計數試劑)中含有WST–8(2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽)，它在電子載體1-甲氧基-5-甲基吩嗪 硫酸二甲酯(1-Methoxy PMS)的作用下被細胞線粒體中的脫氫酶還原為具有高度水溶性的黃色甲臜產物(Formazan)，生成的甲臜物的數量與活細胞的數量成正比，用酶聯免疫檢測儀在450nm波長處測定其光吸收值，可間接反映活細胞數量。注：貼壁細胞和懸浮細胞均可使用此方法，懸浮細胞CCK-8孵育時間應適當延長。

　　2.MTT測試

　　活細胞線粒體內的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原成水不溶性的藍紫色結晶甲臜(Formazan)并沉積在細胞中，而死細胞無此功能;二甲基亞砜能溶解細胞中的甲臢，MTT結晶形成的量與細胞數成正比，使用多功能酶標儀在490nm處測定其吸光值，從而定量測定細胞的存活比例。

　　注：多用于貼壁細胞。

　　3、Live/Dead細胞染色

　　活/死細胞雙染試劑盒可同時對活細胞和死細胞進行熒光染色。該試劑盒包含鈣黃綠素-AM和碘化丙啶(PI)兩種溶液，分別用于染色活細胞和死細胞。其中鈣黃綠素-AM，即鈣黃綠素的乙酰羥甲基酯，具有高度親脂性和細胞膜透過性。盡管鈣黃綠素-AM自身并非熒光分子，但活細胞中的酯酶可以催化鈣黃綠素-AM生成鈣黃綠素，從而發出強烈的綠色熒光(λex 490 nm, λem 515 nm). 因此鈣黃綠素-AM只能染色活細胞。而核染色染料PI不能透過活細胞的細胞膜。但可以透過死細胞膜的變性區域來到達細胞核，并與細胞中的DNA雙螺旋結構結合，從而發出紅色熒光(λex 535 nm, λem 617 nm)。鈣黃綠素和PI-DNA都能被490nm波長的光激發，因此可以采用熒光顯微鏡同時監測活細胞和死細胞。使用λex激發光時只能觀察到死亡細胞。