1.簡介
    在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程，z后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。分為SYBRGreen法與TaqMan探針法。
    熒光染料法：實驗設計簡單（僅需2個引物，無需設計探針），初始成本低，靈敏度高，但需要進行熔解曲線分析檢驗擴增反應的特異性。適用于非特異性檢測（專一性要求不高或高通量檢測）。
    探針法：有高特異性（引物和探針共同于模板結合），高信噪比，能進行多重反應。但成本高，實驗設計繁瑣。適用于擴增序列專一檢測。
2.服務流程

 

1. 送樣要求
（1）A：細胞、細菌、真菌、動植物組織等均可寄送，為了保證實驗要求，樣品數盡可能準備充足。

          注意事項
          1. 組織在1-2min內完成取材，速凍，并立即放入-80℃或液氮中保存。
          2. 有條件的話，z好先將樣本在液氮中速凍，再轉入-80℃冰箱中保存。
          3. 使用的凍存管z好也用DEPC處理。
          4. 對于組織及細胞樣本，如果沒有液氮或-80℃冰箱，也可用RNAlater保存，但是組織一定要切成比較小的塊狀，-20℃保存運輸。
      B：細胞沉淀：細胞量大于10^6的細胞/組；細菌沉淀：細菌量大于10^8的細菌/組；
      C：土壤、污泥樣本：至少10g；
      D：環境水樣：至少1L/組，寄送裝有過濾定量水樣的濾膜（4°C），干燥寄送。 如果其他樣品寄送需求，請與工作人員溝通確認！
（2）待測樣品為RNA樣品及cDNA樣本，RNA濃度不低于200ng/uL，DNA濃度不低于20ng/uL，核酸體積10uL/檢測基因，且樣品接收后需先進行質檢，質檢合格的開展后續項目（核酸樣本需包裝完整，離心管用封口膜封閉，干冰寄送）。
（3）不接受具有致病性的樣品。
（4）待測樣品（原始樣品或者RNA或者cDNA，原始樣品可由我們代處理，RNA樣品及cDNA樣本接收后需先進行質檢，質檢合格的開展后續項目）;
（5）提供所需的引物/標準品（或平臺代設計及合成）；提供檢測基因的序列和引物序列，若基因序列來自文獻等其他途徑，可以多參考幾組，避免引物特異性不足，延長實驗周期。
（6）其他所涉及的細胞、試劑盒以及生物耗材等平臺都可以有償提供。