1.簡介：  
流式細胞術（flow cytometry，FCM）是利用流式細胞儀對于處在快速直線流動狀態中的細胞或生物顆粒同時進行多參數、快速定量分析和分選的高新技術。其特點是：第一，只要樣本制備成單個細胞或生物顆粒懸液均可以分析。第二，測量速度快，每秒中可以測量數千個乃至數萬個細胞。第三，同時測量每個細胞的多參數特征。
2.樣品處理：（以流式周期為例）
⑴細胞收集：棄去上清，加入 PBS清洗一次，再加入胰酶消化細胞，加入PBS終止消化，用移液槍輕輕吹打細胞，制備細胞懸液，700 rpm離心5 min收集細胞。
⑵PBS洗滌細胞：加入PBS重懸細胞，700 rpm離心5 min，混勻。
⑶固定過夜：加入預冷的75％乙醇，重懸細胞，4℃過夜固定。
⑷PBS洗滌細胞：加入2 ml PBS混勻后，700rpm離心5 min收集細胞，PBS重懸，離心收集細胞。加入100 ul PBS重懸細胞。
⑸去除RNA：加入2 μl 濃度為1 mg/ml 的RNaseA（去離子水配制），37℃水浴40 min。
⑹熒光標記：加入100 μl濃度為100 μg/ml 的PI染色液（PBS配制），避光染色20 min。
⑺上機檢測：流式細胞儀使用激發波長488 nm，發射波長585±21 nm進行檢測，用flowj軟件分析細胞周期以確定細胞周期分布。

 

1.樣本制備：
（1）不需要細胞、細菌等處理的樣本
a：可直接上機測試的樣本（已有熒光），根據樣本性質避光4℃或者常溫保存；
b：樣本需要進行染色處理后上機測試，根據樣本性質避光4℃或者常溫保存，標明染色試劑盒和測試條件，若需要特殊染色試劑盒，請自行提供或本公司代為購買.
（2）需要制樣處理的樣本
樣本需要和細胞/細菌共培養，用染色劑處理之后上機測試。
a:液體類。根據測試時樣本濃度和檢測時間點而定，按照單次檢測需要的3-5倍的量寄送樣本；若采用稀釋后樣本測試，則須告知稀釋倍數及工作液濃度；若溶劑為有機溶劑（如DMSO，醇類，酚類等），z高工作液濃度中，溶劑的占比低于0.5%。
b:粉末類。送樣量根據測試時樣本濃度和檢測時間點而定，按照單次檢測需要的3-5倍的量寄送；
①可溶性粉末：注明溶劑的種類（如無水乙醇，異丙醇，DMSO，培養基，PBS或者生鹽水等），當樣品對溶劑有特殊需求時，請在送樣時附加所需溶劑；
②不可溶粉末：注明樣本性質，滅菌方式，及分散為均勻懸浮液所需必要步驟。
c:塊體類—薄膜、布料、金屬塊、紙片、凝膠等
送樣量：該類樣本處理方式建議為先鋪細胞，再放材料（適用于材料輕薄）；或者浸提處理，可參考國標ISO 10993-12 2007中的浸提方式浸提，根據浸提方式按量和檢測時間點提供；
制樣要求：若是需要把細胞接種到材料上的話，金屬塊、凝膠類樣本須制備成統一大小的圓形/方形，建議制備直徑為30-33 mm圓形。布料、紙片類樣本可代為裁剪，默認制備直徑為32 mm。
2.請務必認真填寫預約單各項內容，標明分組情況和測試條件等，寄送樣品時請您附帶一份送樣單。
3.用parafilm膜將樣本管密封后置于50毫升離心管或類似容器里，旋緊蓋子。樣品包裝請套上自封袋，且盡量將樣品置于緩沖物如泡沫墊、棉花、凍存盒內，以免運輸過程中損壞。
4.流式細胞術一般每個樣品上機檢測2次，以驗證樣品均一性和儀器穩定性，務必寄送可以滿足一次以上實驗的樣品量，以免反復寄送，如所需樣品量不清楚請及時前期對接技術顧聯系。
5.原則上不接收郵寄細菌、藻類、真菌、細胞等需要直接上機檢測的樣品，因為在郵寄過程中樣品狀態發生變化會導致檢測結果不準確，如有需要，請聯系e測試工作人員。