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分子蛋白平臺

Western Blot(蛋白免疫印跡)檢測

儀器型號

Hitachi Regulus8100,Sigma 300;Zeiss Gemini 300; Hitachi S4800;JSM-7800F;蔡司 Supra 55等

預約次數:42651
新客專享:首單立減200元
測試收費:溝通
詳細介紹
 
項目介紹
 
1.簡介:
     采用聚丙烯酰胺凝膠電泳,檢測物是蛋白質,將抗體作為探針,標記的二抗作為顯色工具。經過PAGE分離的蛋白質樣品,轉移到固相載體(例如硝 酸纖維素薄膜)上,固相載體以非共價鍵形式吸附蛋白質,且能保持電泳分離的多肽類型及其生物學活性不變。
     以固相載體上的蛋白質或多肽作為抗原,與對應的抗體起免疫反應,再與酶或同位素標記的二抗發生反應,經過底物顯色或放射自顯影以檢測電泳分離的特異性目的基因表達的蛋白成分。該技術廣泛應用于檢測蛋白水平的表達。
2.服務流程:
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樣本要求
 
1、新鮮樣品:1、0.1g新鮮組織(至少),干冰運輸;
2、細胞:細胞類型樣本細胞數為1*106以上),收集細胞后PBS清洗三遍,離心去除上清,干冰運輸;
3、若客戶提供已提取的蛋白液,蛋白提取方法請參考:心肝脾腎等組織可每50~100mg加1ml裂解液,肺100~200mg加1ml裂解液。加入裂解液前,盡量將組織剪成小塊。
4、需提供待測樣品的一抗及其說明書(一抗一般為10μl左右,也可由平臺代購);其他所涉及的細胞、試劑盒以及生物耗材均可由本平臺均有償提供。
 
常見問題
 
question
1、Western blot為什么背景模糊?
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question 
2、樣品要如何準備?
① 新鮮樣品:1、0.1g新鮮組織(至少)2、加入蛋白裂解液,干冰運輸;
② 細胞:細胞類型樣本細胞數為1*106以上),干冰運輸;
③ 對于心肝脾腎等組織可每50~100mg加1ml裂解液,肺100~200mg加1ml裂解液。加入裂解液前,盡量將組織剪成小塊。
④ 需提供待測樣品的一抗及其說明書(一抗一般為10μl左右,也可由平臺代購);其他所涉及的細胞、試劑盒以及生物耗材均可由本平臺均有償提供。
question
3、為什么條帶會出現彌散?
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