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分子蛋白平臺(tái)

分子間相互作用(分子互作檢測(cè))

儀器型號(hào)

Hitachi Regulus8100,Sigma 300;Zeiss Gemini 300; Hitachi S4800;JSM-7800F;蔡司 Supra 55等

預(yù)約次數(shù):28651
新客專享:首單立減200元
測(cè)試收費(fèi):溝通
詳細(xì)介紹
 
項(xiàng)目介紹
 
等溫量熱滴定(ITC)
1.簡(jiǎn)介:
將一種反應(yīng)物置于一個(gè)溫控樣品池中 ,并通過一個(gè)熱電偶回路與參比池相偶聯(lián),樣品池和參比池處于相同的外部環(huán)境,特定的滴定劑(按試驗(yàn)需求選擇)定量滴加到樣品池中,當(dāng)樣品與滴定劑發(fā)生反應(yīng)時(shí),樣品池與參比池的溫度會(huì)發(fā)生變化,反應(yīng)變化的能量可以被靈敏的檢測(cè)到,并通過正反饋或負(fù)反饋觸發(fā)恒溫裝置保持溫度恒定。
2.適用范圍:
核酸-小分子、生物分子-細(xì)胞相互作用、酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)等,可以檢測(cè)任意兩種小分子之間的結(jié)合力,要求檢測(cè)樣品的純度高。
3.測(cè)試參數(shù):
結(jié)合常數(shù)KD、化學(xué)計(jì)量比n、熱力學(xué)參數(shù)dH,dS。
4.送樣須知:
提供z少樣品量:蛋白2mg,小分子10mM/500ul,樣品濃度越高越好,蛋白多肽需低溫寄送。
5.交付內(nèi)容:
原始數(shù)據(jù)及曲線圖。

生物膜干涉(BLI)
1.簡(jiǎn)介:
生物膜干涉技術(shù)采用探針式生物傳感器對(duì)樣品直接進(jìn)行檢測(cè),對(duì)檢測(cè)樣品無需做任何熒光或同位素標(biāo)記。通過儀器發(fā)射白光到傳感器表面并收集反射光,不同頻率的反射光譜受到生物傳感器的光膜層厚度的影響并形成干涉。因此,結(jié)合到傳感器表面的分子一旦有數(shù)量上的增減,光譜儀便會(huì)實(shí)時(shí)地檢測(cè)到干涉光譜的位移,而這種位移可直接反應(yīng)出傳感器表面生物膜的厚度及密度變化,從而對(duì)待測(cè)分子間的相互作用過程進(jìn)行精確的定量測(cè)定。
2.適用范圍:
任意兩種小分子,其中一個(gè)需要有氨基(所有的蛋白都有),帶氨基的樣品要純度高,另一個(gè)沒要求。
3.測(cè)試參數(shù):
結(jié)合常數(shù)KD、結(jié)合速率常數(shù)Ka、解離速率常數(shù)Kd。
4.送樣須知:
需提供z少樣品量:蛋白1mg,小分子100mM/1mL,蛋白多肽需低溫寄送。
5.交付內(nèi)容:
原始數(shù)據(jù)及曲線圖。

光學(xué)表面等離子共振(SPR)
1.簡(jiǎn)介:
先將一種生物分子(靶分子)鍵合在生物傳感器表面,再將含有另一種能與靶分子產(chǎn)生相互作用的生物分子(分析物)的溶液注入并流經(jīng)生物傳感器表面。生物分子間的結(jié)合引起的變化即被觀察到。
2.適用范圍:
蛋白-蛋白、抗體-抗原、蛋白-小分子、抗體-多肽、蛋白-DNA、DNA-DNA、蛋白-納米材料等分子間相互作用力,檢測(cè)樣品中須有一種是蛋白,且兩種樣品純度要求均高。
3.測(cè)試參數(shù):
結(jié)合常數(shù)KD、結(jié)合速率常數(shù)Ka、解離速率常數(shù)Kd。
4.送樣須知:
提供最少樣品量:蛋白50-100μg,小分子20μM/200μL,蛋白多肽需低溫寄送。
5.交付內(nèi)容:
原始數(shù)據(jù)及曲線圖。

微量熱泳動(dòng)(MST)
1.簡(jiǎn)介:
微量熱泳動(dòng)是一種表征生物分子特性的光學(xué)方法,是粒子在微觀溫度梯度中的定向運(yùn)動(dòng)。生物分子的質(zhì)量、電荷、水化層和構(gòu)象發(fā)生改變均可導(dǎo)致分子在溫度梯度場(chǎng)中運(yùn)動(dòng)速度的變化,這種變化可以用來分析分子間相互作用以及各種化學(xué)劑量學(xué)參數(shù)。將波長(zhǎng)為1480 nm 的紅外激光照射于熒光激發(fā)光路上,通過分色鏡照射到毛細(xì)管中的樣品,樣品中的水分子吸收紅外光發(fā)熱而形成溫度梯度。MST 儀器通過記錄激光器打開前、打開期間和打開后處于溫度梯度中的樣品內(nèi)部紅外激光照射區(qū)域的熒光變化情況,從而實(shí)現(xiàn)較短時(shí)間的測(cè)定。 
2.適用范圍:
蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)(包括抗原-抗體、分子伴侶-底物)、蛋白質(zhì)-核酸、核酸-核酸、蛋白-小分子(蛋白酶與抑制劑、細(xì)胞膜蛋白活性)、蛋白-肽、肽-肽等相互作用,比ITC能檢測(cè)更微小的相互作用。
3.測(cè)試參數(shù):
結(jié)合常數(shù)KD。
4.送樣須知:
需提供最少樣品量:蛋白10uM/ 100ul,小分子100uM/200ul,蛋白多肽需低溫寄送。
注:為保證試驗(yàn)可靠性,條件允許的情況下盡量多提供一些樣品。
5.交付內(nèi)容:
原始數(shù)據(jù)及曲線圖。
6.試驗(yàn)周期:
具體試驗(yàn)周期請(qǐng)于工作人員聯(lián)系。
 
樣本要求
 
ITC:提供最少樣品量:蛋白2mg,小分子10mM/500ul,樣品濃度越高越好,蛋白多肽需低溫寄送。
BLI:任意兩種小分子,其中一個(gè)需要有氨基(所有的蛋白都有),帶氨基的樣品要純度高,另一個(gè)沒要求。
SPR:提供最少樣品量:蛋白50-100μg,小分子20μM/200μL,蛋白多肽需低溫寄送。
MST:需提供最少樣品量:蛋白10uM/ 100ul,小分子100uM/200ul,蛋白多肽需低溫寄送。
 
結(jié)果展示
 
51678f98e414eb9b6681de4eff9a22af1906524843ad69ea5c7de0228efc6513
 
常見問題
 
question 
1、 ITC結(jié)合力參數(shù)含義?
?H: 焓變,負(fù)值表示放熱,正值表示吸熱;?S: 熵變,正值反應(yīng)容易自發(fā)進(jìn)行,負(fù)值代表反應(yīng)不容易自發(fā)進(jìn)行;?G=?H-T?S也是一種熱力學(xué)參數(shù)。
question
2、MST實(shí)驗(yàn)和SPR實(shí)驗(yàn)的靈敏度誰比較高?
MST靈敏度更高,靈敏度對(duì)比排序:MST>SPR>ITC

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