細胞遷移 (cell migration) 也稱為細胞爬行、細胞移動或細胞運動,是指細胞在接收到遷移信號或感受到某些物質的梯度后而產生的移動。細胞遷移為細胞頭部偽足的延伸、新的黏附建立、細胞體尾部收縮在時空上的交替過程。細胞遷移是正常細胞的基本功能之一,是機體正常生長發育的生理過程,也是活細胞普遍存在的一種運動形式。胚胎發育、血管生成、傷口愈合、免疫反應、炎癥反應、動脈粥樣硬化、癌癥轉移等過程中都涉及細胞遷移。
1、細胞劃痕
細胞劃痕(修復)法是一種簡捷的測定細胞遷移運動與修復能力的方法,類似體外傷口愈合模型,在體外培養皿或平板培養的單層貼壁細胞上,使用槍頭或者其他硬物在單層細胞的中央區劃線,去除中央部分的細胞,然后繼續培養細胞至實驗設定的時間(采用低血清或者無血清培養基培養以排除細胞增殖的影響),取出細胞培養板,觀察周邊細胞是否生長(修復)至中央劃痕區,以此判斷細胞的生長遷移能力,服務流程如下:
準備:所有能滅菌的器械都要滅菌,直尺和marker筆在操作前紫外照射30min(超凈臺內)
(1)先用marker筆在6孔板背后,用直尺比著,均勻得劃橫線,大約每隔0.5~1cm一道,橫穿過孔。每孔至少穿過5條線。
(2)在空中加入約5X105個細胞,具體數量因細胞不同而不同,掌握為過夜能鋪滿。
(3)第二天用槍頭比著直尺,盡量垂至于背后的橫線劃痕,槍頭要垂直,不能傾斜。
(4)用PBS洗細胞3次,去處劃下的細胞,加入無血清培養基。
(5)放入37度5%CO2培養箱,培養。按0,6,12,24小時取樣,拍照。
2、細胞侵襲
細胞遷移與侵襲實驗將Transwell小室放入培養板中,小室內稱上室,培養板內稱下室,上室內盛裝上層培養液,下室內盛裝下層培養液,上下層培養液以聚碳酸酯膜相隔。將細胞種在上室內,由于聚碳酸酯膜有通透性,下層培養液中的成分可以影響到上室內的細胞,從而可以研究下層培養液中的成分對細胞生長、運動等的影響。應用不同孔徑和經過不同處理的聚碳酸酯膜,就可以進行共培養、細胞趨化、細胞遷移、細胞侵襲等多種方面的研究,服務流程如下:
待測樣品(濃度客戶指定)、具體實驗方案與要求;涉及到的細胞、耗材試劑盒本實驗室均可有償提供。
交付內容:完整實驗報告及拍攝圖片
如何選擇細胞劃痕法或Transwell法?
細胞劃痕:適用貼壁細胞的創傷愈合;
Transwell法:構建細胞共培養體系;趨化性實驗;腫瘤遷移/侵襲實驗。