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分子蛋白平臺(tái)

克隆抗體制備

儀器型號(hào)

Hitachi Regulus8100,Sigma 300;Zeiss Gemini 300; Hitachi S4800;JSM-7800F;蔡司 Supra 55等

預(yù)約次數(shù):62187
新客專享:首單立減200元
測試收費(fèi):溝通
詳細(xì)介紹
 
項(xiàng)目介紹
 
1. 多克隆抗體的制備
1.1. 簡介:
多克隆抗體可識(shí)別多個(gè)抗原表位,可以幫助放大低水平表達(dá)的蛋白的信號(hào),并且多克隆抗體的制備工藝也較為簡單,由于多克隆抗體含有針對(duì)多個(gè)表位的多種抗體,所以是檢測變性蛋白的首選,多個(gè)表位通常會(huì)提供更強(qiáng)大的檢測能力。
1.2. 服務(wù)流程:
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2. 單克隆抗體的制備
2.1 簡介:
單克隆抗體是由一個(gè)只識(shí)別一種表位的B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的同源抗體,特異性強(qiáng),效價(jià)高,交叉反應(yīng)少或無交叉反應(yīng),但其制備過程較為復(fù)雜。
單克隆抗體技術(shù)可針對(duì)生物大分子(主要是蛋白質(zhì))進(jìn)行準(zhǔn)確定性、定量、定位的手段,如今已經(jīng)應(yīng)用至生物研究的各個(gè)方面,例如通過細(xì)胞表面蛋白標(biāo)記對(duì)細(xì)胞進(jìn)行分類篩選分析的熒光細(xì)胞分選技術(shù)、展示細(xì)胞內(nèi)特定蛋白定位的高分辨率熒光顯微鏡、檢測蛋白質(zhì)混合物中特定蛋白表達(dá)量的蛋白印跡法,常用于血清中細(xì)胞因子表達(dá)量測定的酶聯(lián)免疫吸附測定等,這些技術(shù)都需要運(yùn)用到高質(zhì)量的單克隆抗體制劑。
2.2.服務(wù)流程:
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樣本要求
 
需提供蛋白或由本平臺(tái)進(jìn)行目的蛋白表達(dá)純化,多肽信息或由本平臺(tái)進(jìn)行設(shè)計(jì)合成,小分子化合物等材料的詳細(xì)信息;需要單克隆抗體的濃度與總量;是否需要提供鑒定結(jié)果,如需鑒定請(qǐng)?zhí)峁┛贵w及其說明書
 
結(jié)果展示
 
交付內(nèi)容: 如需詳細(xì)結(jié)果請(qǐng)聯(lián)系我們工作人員
單克隆抗體:提供詳細(xì)實(shí)驗(yàn)報(bào)告,2-3株單克隆細(xì)胞株,陽性細(xì)胞培養(yǎng)上清,純化后抗體2-5mg,ELISA效價(jià)檢測結(jié)果和Western blot結(jié)果。
多克隆抗體:提供詳細(xì)實(shí)驗(yàn)報(bào)告,抗血清40ml 以及ELISA效價(jià)檢測結(jié)果和Western blot結(jié)果。
 
常見問題
 
question
1、細(xì)胞融合的關(guān)鍵是什么?
①技術(shù)上的失誤常常導(dǎo)致融合的失敗,例如淋巴細(xì)胞沒有免疫反應(yīng),融合劑的選用以及融合細(xì)胞是的操作。
②融合試驗(yàn)z大的失敗原因是污染,融合成功的關(guān)鍵是提供一個(gè)無菌無毒的操作環(huán)境。
question 
2、陽性克隆細(xì)胞的篩選的方法有哪些?
應(yīng)盡早進(jìn)行。通常在融合后10天作第一次檢測,過早容易出現(xiàn)假陽性。檢測方法應(yīng)靈敏、準(zhǔn)確、而且簡便快速。具體應(yīng)用的方法應(yīng)根據(jù)抗原的性質(zhì),以及所需單克隆抗體的功能進(jìn)行選擇。常用的方法有RIA法、ELISA法和免疫熒光法等。其中ELISA法簡便,RIA法準(zhǔn)確。陽性克隆的篩選應(yīng)進(jìn)行多次,均陽性時(shí)才確定為陽性克隆進(jìn)行擴(kuò)增。

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