冷凍透射電子顯微鏡(Cryogenic Transmission Electron Microscopy, Cryo-TEM)是一種先進的生物物理學和結構生物學研究工具,它能夠在低溫(接近液氮溫度,即約-196℃)下對樣品進行快速冷凍固定,從而保持其天然狀態下的水合環境和生物活性構象。在這樣的條件下,對易失活或變形的生物大分子(如蛋白質、核酸、脂質體以及整個細胞等)進行成像時,能夠z大限度地減少電子束照射帶來的輻射損傷。
冷凍透射電鏡的工作原理與常規透射電鏡相似,但額外配備了冷凍樣品臺和一套精密的冷凍制樣系統。樣品首先迅速冷凍并在液態乙烷或液氮中迅速投入揮發性溶液中形成玻璃態冰,這樣可以避免形成破壞樣品結構的大冰晶。然后,冷凍樣品被轉移至顯微鏡內的真空環境中,在極低溫度下,電子束穿透樣品并被檢測器捕捉,進而生成高分辨率的二維投影圖像。通過計算機重構技術,可以從多個角度獲取的二維投影圖像重建出三維結構信息。
1.送樣要求
1)水溶液樣品,體積200微升,要求濃度比常溫測試大100-1000倍。含有機溶劑的樣本,送樣前請與e測試工作人員溝通。
2)粉末要求5-10mg,分散劑默認是水,粉末粒度不超1um。
3)不測揮發有毒有磁性放射性樣品。
2.服務周期:一般為樣品接收后的1-2周左右,如遇法定假期需要順延,具體實驗周期及送樣時間請與e測試工作人員溝通確認,謝謝!
3.交付內容:每樣提供10張拍攝圖片(不提供分析服務),如需照片數量超過將產生額外費用;
結果反饋請在測試完成一周內,不建議回收樣品,如有需要請提前反饋給e測試工作人員。
哪些樣本需要拍冷凍透射電鏡?
生物大分子、病毒顆粒、細胞亞結構、納米材料等需要在接近自然狀態下維持其三維結構以進行高分辨率成像的生物樣品,尤其當它們無法承受常規電鏡所需的干燥、染色或其他處理步驟時,都是冷凍透射電鏡的理想研究對象。通過快速冷凍技術,樣品能夠被固定在一種類似于“玻璃態”的水中,避免了冰晶的形成和結構扭曲,從而保持其生物活性狀態下的結構完整性。