細胞毒性檢測是生物相容性測試的一種，檢測藥物或者新型材料在生物環境中的毒性情況，即通過檢測材料或者藥物對細胞的增殖或者生長的影響，來評價藥物或材料的毒性或者活性，主要用于藥物活性篩選、細胞增殖/毒性測定、抗腫瘤藥效計算IC50等；常用MTT法或者CCK8法檢測，另外也可以通過Live/dead雙染法進行細胞成像，更直觀的記錄細胞的存活情況。
1.CCK-8測試
    實驗原理：CCK-8試劑（Cell Counting Kit-8 細胞計數試劑）中含有WST–8（2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽），它在電子載體1-甲氧基-5-甲基吩嗪 硫酸二甲酯（1-Methoxy PMS）的作用下被細胞線粒體中的脫氫酶還原為具有高度水溶性的黃色甲臜產物（Formazan），生成的甲臜物的數量與活細胞的數量成正比，用酶聯免疫檢測儀在450nm波長處測定其光吸收值，可間接反映活細胞數量。注：貼壁細胞和懸浮細胞均可使用此方法，懸浮細胞CCK-8孵育時間應適當延長。
   服務流程：

2.MTT測試
    實驗原理：活細胞線粒體內的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原成水不溶性的藍紫色結晶甲臜（Formazan）并沉積在細胞中，而死細胞無此功能；二甲基亞砜能溶解細胞中的甲臢，MTT結晶形成的量與細胞數成正比，使用多功能酶標儀在490nm處測定其吸光值，從而定量測定細胞的存活比例。注：多用于貼壁細胞。
    服務流程：

3、Live/Dead細胞染色
    活/死細胞復染試劑盒可同時對活細胞和死細胞進行熒光染色。該試劑盒包含鈣黃綠素-AM和碘化丙啶(PI)兩種溶液，分別用于染色活細胞和死細胞。其中鈣黃綠素-AM，即鈣黃綠素的乙酰羥甲基酯，具有高度親脂性和細胞膜透過性。盡管鈣黃綠素-AM自身并非熒光分子，但活細胞中的酯酶可以催化鈣黃綠素-AM生成鈣黃綠素，從而發出強烈的綠色熒光(λex 490 nm, λem 515 nm). 因此鈣黃綠素-AM只能染色活細胞。而核染色染料PI不能透過活細胞的細胞膜。但可以透過死細胞膜的變性區域來到達細胞核，并與細胞中的DNA雙螺旋結構結合，從而發出紅色熒光(λex 535 nm, λem 617 nm)。鈣黃綠素和PI-DNA都能被490nm波長的光激發，因此可以采用熒光顯微鏡同時監測活細胞和死細胞。使用λex激發光時只能觀察到死亡細胞。
    服務流程：

 

1.液體類
根據測試時樣本濃度和檢測時間點而定，按照單次檢測需要的3-5倍的量寄送；若采用稀釋后樣本測試，則須告知稀釋倍數及工作液濃度；若溶劑為有機溶劑（如DMSO，醇類，酚類等），z高工作液濃度中，溶劑的占比低于0.5%。
2.粉末類
根據測試時樣本濃度和檢測時間點而定，按照單次檢測需要的3-5倍的量寄送；
    a. 可溶性粉末：注明溶劑的種類（如無水乙醇，異丙醇，DMSO，培養基，PBS或者生鹽水等），當樣品對溶劑有特殊需求時，請在送樣時附加所需溶劑；
    b. 不可溶粉末：注明樣本性質，滅菌方式，及分散為均勻懸浮液所需必要步驟，
     如果不可使用分散液，需要預試，樣本量可跟前期對接技術顧問溝通確認。
3.塊體類
    a. 樣品與細胞的作用方式為直接接觸的話，至少3個/種細胞/時間點；
    b.樣本處理方式為浸提的話，可參考國標ISO 10993-12 2007中的浸提方式浸提，根據浸提方式按量和檢測時間點提供；
    c.若是需要把細胞接種到材料上的話，金屬塊、凝膠類樣本須制備成統一大小的圓形/方形，建議制備直徑為5-7 mm圓形。布料、紙片類樣本可代為裁剪，默認制備直徑為6 mm。

 

1、細胞毒性交付結果
將各組吸光度值輸入Excel并計算相對活力（相對活力%=（實驗組OD值-背景OD值）/（對照組OD值均值-背景OD值）×100），其中背景OD值為只加CCK8/MTT試劑和培養基的吸光度。將相對活力數值輸入GraphPad Prism作圖，結果如下：

2、細胞死活染色交付結果
1. 交付內容
熒光顯微鏡，共聚焦可任選其一進行拍攝，一般提供5-6個視野，可選擇不同倍數，需要了解詳細的結果形式，請聯系我們工作人員
2、結果展示