1.簡介:
慢病毒(Lentivirus) 是逆轉錄病毒的一種,慢病毒具有感染譜廣泛特點,并且可以有效感染分裂和非分裂細胞。一經感染宿主細胞,慢病毒即利用反轉錄酶將其RNA轉錄成雙鏈DNA,隨后永久的整合到宿主細胞的染色體中,實現長時間穩定表達。此外,慢病毒免疫原性低,不易造成免疫反應,所以現在慢病毒系統除了被廣泛應用到各種細胞系的基因敲除/敲入、基因過表達、RNA干擾、microRNA研究,還大量應用于活體動物實驗中。
2. 實驗流程:
客戶提供詳細的實驗方案→提供目的基因信息(質粒測序圖譜、名稱、序列等)→所需要的病毒滴度及病毒液總量→是否需要純化,若需檢測外源基因的表達,請提供相應抗體。
1、慢病毒包裝的應用有哪些呢?
慢病毒(Lentivirus)載體是目前細胞及模式生物實驗中非常有效的工具,在基因轉染方面有著許多獨特的優勢,對分裂細胞和非分裂細胞均能夠有效感染,可容納較大基因片段,同時能夠將攜帶的基因穩定的整合到基因組中等優勢,慢病毒包裝逐漸成為科研必備的實驗技能之一,多用于感染各種腫瘤細胞,建立穩定表達或沉默目的蛋白的細胞株。
2、慢病毒感染后多久檢測細胞基因表達?
慢病毒感染后一般 72~96h 后檢測基因表達,對于生長遲緩代謝慢的細胞,可以適當推遲檢測時間,中途換液保持細胞的良好狀態。
3、通常在轉移載體中z大能夠插入多大的目的基因序列?
基于 HIV 基因骨架的原因,通常插入的目的基因序列要小于4 kb,否則會影響病毒滴度甚至基因表達。