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免疫組化(Immunohistochemistry,IHC)是一種在組織學和細胞學中廣泛應用的技術,它利用抗原-抗體反應的特異性來檢測和定位組織或細胞中的特定蛋白質(zhì)。免疫組化技術不僅可以用于定性檢測,還可以進行相對定量分析,是現(xiàn)代病理學、分子生物學和臨床診斷中不可或缺的工具。
免疫組化的基本步驟通常包括:
樣本制備:組織樣本通常需要進行固定、包埋(如石蠟包埋)和切片處理,以便后續(xù)的操作。
脫蠟和水化:如果是石蠟包埋的樣本,需要通過有機溶劑去除石蠟,并逐步用水化來恢復組織的親水性。
抗原修復:為了提高抗體的識別效率,可能需要通過熱誘導、酶消化等方式來修復或暴露抗原表位。
封閉非特異性結(jié)合位點:使用血清或蛋白質(zhì)溶液封閉組織上的非特異性結(jié)合位點,以減少背景染色。
一抗孵育:將樣本與特異性抗體(一抗)在適宜條件下孵育,使抗體與目標抗原結(jié)合。
清洗:去除未結(jié)合的抗體,準備下一步操作。
標記和顯色:使用標記的二抗或標記的一抗,通過酶促反應、熒光標記等手段進行顯色,以可視化抗原-抗體復合物。
復染:為了增加樣本的對比度,可能會使用復染劑,如蘇木精,對細胞核進行染色。
封片:使用封片劑將樣本y久固定在載玻片上,以便長期保存和觀察。
觀察和分析:使用光學顯微鏡或熒光顯微鏡觀察染色結(jié)果,進行圖像記錄和分析。
免疫組化在臨床上的應用主要包括:
腫瘤的診斷與鑒別診斷
確定轉(zhuǎn)移性腫瘤的原發(fā)部位
腫瘤的病理分型
軟組織腫瘤的診斷和分類
微小轉(zhuǎn)移灶的檢測
評估腫瘤的預后和指導治療方案的選擇
在科研領域,免疫組化也是研究蛋白質(zhì)表達、定位和功能的重要工具。
免疫組化染色的費用因地區(qū)、醫(yī)院、檢測項目數(shù)量以及是否采用自動化設備等因素而異。
如果涉及多個檢測項目,總費用可能會顯著增加,因為每個額外的抗體或標記都需要額外的費用。有些醫(yī)院或?qū)嶒炇铱赡軙峁┨撞头?,針對特定類型的疾?如癌癥)進行一系列相關檢測,這種情況下總費用可能高點。
如果您需要進行免疫組化染色,建議直接聯(lián)系您所在地區(qū)的醫(yī)療機構或者檢測機構比如e測試,獲取價格信息詳情。
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