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免疫組化和免疫熒光的區別

更新時間:2025-03-11 點擊次數:0 所屬欄目:行業信息

  免疫組化(IHC)和免疫熒光(IF)是兩種常用的實驗技術,用于檢測組織或細胞中特定蛋白質的表達和定位。以下是它們的簡要介紹和區別:

  免疫組化(IHC)

  原理:利用抗體與目標抗原的特異性結合,通過酶促反應產生可見的顯色信號。

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  步驟:

  樣本固定和包埋。

  切片和抗原修復。

  封閉非特異性結合位點。

  一抗孵育。

  二抗(偶聯酶)孵育。

  顯色反應。

  顯微鏡觀察。

  優點:

  結果穩定,適合長期保存。

  普通光學顯微鏡即可觀察。

  適用于病理診斷和研究。

  缺點:

  通常只能檢測一種抗原。

  靈敏度較低。

  免疫熒光(IF)

  原理:利用熒光標記的抗體與目標抗原結合,通過熒光顯微鏡觀察。

  步驟:

  樣本固定和包埋。

  切片和抗原修復。

  封閉非特異性結合位點。

  一抗孵育。

  熒光標記的二抗孵育。

  熒光顯微鏡觀察。

  優點:

  可同時檢測多種抗原。

  靈敏度高。

  適合活細胞和動態過程研究。

  缺點:

  熒光易淬滅,結果不易長期保存。

  需要熒光顯微鏡。

  主要區別

  檢測信號:

  IHC:顯色反應。

  IF:熒光信號。

  顯微鏡:

  IHC:普通光學顯微鏡。

  IF:熒光顯微鏡。

  多重檢測:

  IHC:通常單種抗原。

  IF:可同時檢測多種抗原。

  靈敏度:

  IHC:較低。

  IF:較高。

  結果保存:

  IHC:可長期保存。

  IF:熒光易淬滅,保存時間短。

  應用

  IHC:病理診斷、腫瘤標記物檢測。

  IF:細胞生物學研究、蛋白質共定位。

  總結

  IHC和IF各有優勢,選擇取決于實驗需求。IHC適合長期保存和病理診斷,IF適合高靈敏度和多重檢測。

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