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河南細胞實驗外包服務公司:流式檢測細胞凋亡常用方法

更新時間:2025-02-26 點擊次數:0 所屬欄目:行業(yè)信息

  1、Hoechs-PI雙染色法

  Hoechs-PI染色法的實驗原理,正常細胞對染料有拒染性,熒光著色很淺,凋亡細胞主要攝取hoechs-PI染料,呈現強藍色熒光,而壞死細胞主要攝取碘化丙啶(PI)而呈紅色熒光,所以我們可以很好的區(qū)分正常細胞、壞死細胞和凋亡細胞。

  2、DNA片段原位標記

  DNA片段原位標記法有兩種:第1種是原位缺口轉移技術,它是利用DNA多聚酶I將標記的核苷酸接到斷裂的3'-OH端;第2種是原位缺口末端原位標記技術,利用TdT將標記DUTP接到3'-OH端。

  3、Annexin V聯合PI法

  這個方法可以很好的檢測細胞膜成分變化,其檢測原理是利用對PS有高度親和力的Annexin V, 將Annexin V標記上熒光素,同時結合PI拒染法進行凋亡細胞雙染后,用流式細胞儀檢測凋亡細胞。結果的話,正常活細胞Annexin V、PI 均低染;凋亡細胞Annexin V 高染、PI低染;壞死細胞Annexin V、PI 均高染。

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