1. 形態(tài)學(xué)表征

　　透射電子顯微鏡(TEM)

　　TEM可以直觀觀察外泌體的形態(tài)和超微結(jié)構(gòu)，如雙層膜特征。其分辨率可達(dá)1納米，適合用于外泌體的形態(tài)學(xué)鑒定。

　　優(yōu)點(diǎn)：高分辨率，可直接觀察外泌體結(jié)構(gòu)。

　　缺點(diǎn)：樣品制備復(fù)雜，無法定量分析外泌體濃度。

　　冷凍電鏡(Cryo-TEM)

　　冷凍電鏡通過快速冷凍技術(shù)保留外泌體的天然狀態(tài)，適合觀察含水樣品和敏感樣品，能提供更接近原始狀態(tài)的結(jié)構(gòu)信息。

　　2. 粒徑與濃度分析

　　納米顆粒跟蹤分析(NTA)

　　NTA通過激光照射和布朗運(yùn)動分析外泌體的粒徑分布和濃度，適用于30-1000納米范圍內(nèi)的顆粒檢測。

　　優(yōu)點(diǎn)：快速、實(shí)時、可定量。

　　缺點(diǎn)：可能將外泌體表面的水膜計入，導(dǎo)致粒徑偏大2。

　　動態(tài)光散射(DLS)

　　DLS通過光散射測量顆粒粒徑，適合單分散性樣品，但對復(fù)雜樣品的分辨率較低。

　　3. 蛋白質(zhì)標(biāo)志物檢測

　　Western Blot(WB)

　　WB用于檢測外泌體特異性蛋白標(biāo)志物，如CD63、CD9、CD81、TSG101、Alix和HSP70等。這些標(biāo)志物與外泌體的形成和分泌過程密切相關(guān)1312。

　　優(yōu)點(diǎn)：特異性高，技術(shù)成熟。

　　缺點(diǎn)：無法全面分析外泌體成分，且不同細(xì)胞來源的外泌體標(biāo)志物可能不同。

　　ELISA

　　ELISA可用于定量檢測外泌體表面標(biāo)志物，適合高通量篩選，但只能分析個別標(biāo)志物。

　　4. 分子成分分析

　　質(zhì)譜分析(MS)

　　質(zhì)譜可用于鑒定外泌體中的蛋白質(zhì)、RNA和脂質(zhì)等分子成分，提供全面的分子信息。

　　優(yōu)點(diǎn)：高靈敏度，可定量分析。

　　缺點(diǎn)：設(shè)備昂貴，操作復(fù)雜。

　　RNA測序

　　用于分析外泌體攜帶的RNA(如miRNA、mRNA)，揭示其功能機(jī)制。

　　5. 流式細(xì)胞術(shù)(FCM)

　　流式細(xì)胞術(shù)通過熒光標(biāo)記抗體檢測外泌體表面標(biāo)志物，適合高通量分析，但分辨率較低，無法檢測小于100納米的顆粒。