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DNA合成檢測
利用BrdU/EdU等嵌入DNA的方式,通過后續染色或抗體標記來檢測DNA的合成,可以用來反映細胞增殖情況。
實驗步驟:加入BrdU或EdU到細胞培養基中,讓其嵌入新合成的DNA,然后利用特定的抗體進行檢測,通過流式細胞儀或熒光顯微鏡觀察標記的細胞,進行定量分析。
代謝活性物質檢測
如MTT和CCK-8方法,基于細胞內琥珀酸脫氫酶活性,將無色的底物轉化為有色產物,通過測定產物的量來評估細胞的活性和增殖能力。
實驗步驟:將MTT或CCK-8溶液加入到細胞培養板中,一定時間后,測定溶解產物的吸光度,以此推算細胞活性或數量。
細胞增殖相關抗原檢測
通過特定的細胞周期相關蛋白,如Ki-67和PCNA的表達來評價細胞增殖。
實驗步驟:利用針對Ki-67或PCNA的抗體進行免疫熒光染色,觀察和計算標記陽性的細胞比例,以評估細胞的增殖活性。
ATP濃度檢測
ATP作為細胞能量的直接來源,其濃度的變化可以反映細胞的活力和增殖狀態。
實驗步驟:使用特定的生物發光試劑,如CellTiter-Glo,與細胞共同培養,通過測定發光強度來反映細胞內ATP的濃度,進而評價細胞的活力。
當然,每種細胞增殖與活性檢測方法都各有優缺點,我們還得根據自己實驗的具體需求選擇更合適的方法,醫學實驗外包服務公司e測試也建議,綜合使用多種方法進行交叉驗證,這樣可以獲得更準確、全面的實驗結果。
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