① 標準曲線的繪制;

　　② 根據樣品數量，按 BCA 試劑 A ：BCA 試劑 B(50:1)配制適量 BCA 工作液，充分混勻;

　　③各孔加入 200μL BCA 工作液;

　　④把酶標板放在振蕩器上振蕩 30sec，37℃放置 30 min，然后在 562nm 下比色測定。以蛋白含量(μg)為橫坐標，吸光值為縱坐標，繪出標準曲線;

　　⑤稀釋待測樣品至合適濃度，使樣品稀釋液總體積為 20μL，加入 BCA 工作液 200μL，充分混勻，37℃放置 30 min后，以標準曲線 0 號管做參比，在 562nm 波長下比色，記錄吸光值;

　　⑥ 根據所測樣品的吸光值，在標準曲線上即可查得相應的蛋白含量(μg)，除以樣品稀釋液總體積(20μL)，乘以樣品稀釋倍數即為樣品實際濃度(單位：μg/μL)。