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代謝產(chǎn)物檢測方法有哪些?

更新時間:2024-12-03 點擊次數(shù):0 所屬欄目:行業(yè)信息

  目前,代謝產(chǎn)物檢測主要依賴于高靈敏度和高分辨率的儀器分析技術(shù),其中質(zhì)譜(MS)技術(shù)結(jié)合液相/氣相色譜(LC)是最常用的方法,即LC-MS/GC-MS。這一組合能夠?qū)崿F(xiàn)對復雜生物樣本中多種代謝物的同時定性和定量分析。

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  高效液相色譜(HPLC):以液體為流動相,采用高壓輸液系統(tǒng),將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱,在柱內(nèi)各成分被分離后,進入檢測器進行檢測,從而實現(xiàn)對試樣的分析。

  液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(LCMS):樣品通過液相色譜分離后的各個組分依次進入質(zhì)譜檢測器,各組分在離子源被電離,產(chǎn)生帶有一定電荷、質(zhì)量數(shù)不同的離子。不同離子在電磁場中的運動行為不同,采用質(zhì)量分析器按不同質(zhì)荷比(m/z)把離子分開,得到依質(zhì)荷比順序排列的質(zhì)譜圖。通過對質(zhì)譜圖的分析處理,可以得到樣品的定性和定量結(jié)果。

  氣相色譜(GC):是一種常見的分離和分析技術(shù),主要用于檢測和定量混合氣體或揮發(fā)性有機物的組成。其工作原理是利用樣品中各組分在流動的惰性氣體(如氮氣或氦氣)攜帶下,通過固定相(色譜柱)時因分配系數(shù)不同而實現(xiàn)分離,然后通過檢測器對各個組分進行定性和定量分析。

  氣質(zhì)聯(lián)用(GC-MS):是一種將氣相色譜與質(zhì)譜兩種分析技術(shù)相結(jié)合的高端檢測技術(shù)。在該系統(tǒng)中,樣品首先通過氣相色譜進行分離,根據(jù)各組分在色譜柱上的保留時間差異將其分離成單一組分;隨后,這些分離出的單一組分逐個進入質(zhì)譜儀進行離子化和質(zhì)量分析,從而得到每個組分的精確質(zhì)量和分子結(jié)構(gòu)信息。

  氣相色譜離子遷移譜聯(lián)用儀(GCIMS):是一種結(jié)合了氣相色譜(GC)和離子遷移譜(IMS)兩種技術(shù)的先進分析儀器。在該系統(tǒng)中,樣品首先通過氣相色譜進行高效分離,依據(jù)各組分在色譜柱上的揮發(fā)性和化學性質(zhì)差異實現(xiàn)快速分離;隨后,分離出的單一或相近沸點的化合物進入離子遷移譜部分,在電場和中性漂移氣體作用下,根據(jù)離子在電場中的遷移率差異進行進一步分離和檢測。

  凝膠滲透色譜(GPC):是一種液相色譜技術(shù),主要用于測定高分子化合物的相對分子量及其分布。GPC的工作原理基于體積排除效應,即樣品中的大分子和小分子在通過多孔固定相時由于尺寸差異而表現(xiàn)出不同的遷移速度。

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