?、偌毎囵B(yǎng)處理

　　用6孔板培養(yǎng)細胞，待細胞生長達到60%-70%，根據(jù)實驗需求處理(比如加入藥物)，繼續(xù)培養(yǎng);

　　②細胞收集

　　用胰酶消化細胞，吹打成單細胞懸液，800rpm離心5min,收集細胞沉淀，上清保留，用預冷PBS重懸細胞，制備成單細胞懸液;

　?、奂毎潭?/b>

　　制備的單細胞懸液離心后，去除上清，加入2-3ml預冷70%乙醇，于-20℃固定16h以上;

　　④細胞染色

　　1000rpm 離心5min 后棄上清，用2ml的PBS洗滌2次(注意避免Dnase污染),加入適量的周期染料，37C避光孵育30min;

　?、萆蠙C前過濾

　　PI具有很強的粘附性,容易形成細胞聚團，建議可以使用200目的篩網(wǎng)過濾樣本后上機;

　?、奚蠙C分析

　　低速上樣本，建議有效的單個細胞采集10000個以上;