行業信息
a. 超速離心:
1)低速離心去除細胞和凋亡碎片,
2)更高速離心以消除更大的囊泡,
3)高速離心沉淀外泌體
注:樣本的粘度與分離的外泌體純度有顯著的相關性,因此,具有高粘度的生物樣品(例如血漿和血清樣本)需要更長的超速離心步驟和更高的離心速度。
優點:適用從生物體液和培養基中分離外泌體。
缺點:
■ 對粘性生物流體(如血漿和血清)的提取效率較低。
■ 需配備超速離心機,包括多個離心步驟,耗時較長。
■ 需要樣本量較大。
b. 試劑盒提取--基于聚合物的沉淀技術
基于聚合物的沉淀技術通常包括將樣本與含聚合物的沉淀溶液混合,在4℃溫育并低速離心。用于聚合物沉淀的最常見聚合物之一是聚乙二醇(PEG)。用這種聚合物沉淀具有許多優點,包括對分離的外泌體影響小、pH中性等。目前大多數快速分離外泌體的商品化試劑盒都是基于此方法。 然而基于聚合物的沉淀方法可能會同時分離非囊泡污染物(包括脂蛋白)而且,聚合物材料的混雜可能會影響下游分析。
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