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tunel染色是一種用于檢測細胞凋亡的技術,全稱為“脫氧核糖核苷酸末端轉移酶介導的缺口末端標記法”(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase Mediated dUTP Nick End Labeling)。這項技術基于細胞凋亡過程中DNA的斷裂,產生大量的3'-OH末端。通過脫氧核糖核苷酸末端轉移酶(TdT)的作用,可以將熒光素、過氧化物酶、堿性磷酸酶或生物素標記的脫氧核糖核苷酸標記到這些3'-OH末端上,從而實現對凋亡細胞的可視化檢測。
TUNEL染色的基本原理
DNA斷裂:在細胞凋亡過程中,染色體DNA會發生雙鏈或單鏈斷裂,產生3'-OH末端。
末端標記:TdT可以在這些3'-OH末端將熒光素標記的脫氧核糖核苷酸(通常是dUTP)添加上去。
檢測:通過熒光顯微鏡或流式細胞術等技術檢測標記的DNA片段,從而定位和量化凋亡細胞。
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