小鼠結腸HE染色實驗是一種常用的組織學技術，用于觀察小鼠結腸組織的結構和病理變化。通過這種染色方法，可以清晰地看到細胞核(被蘇木精染成藍色)和細胞質及其他組織成分(被伊紅染成粉紅色或紅色)。以下是進行小鼠結腸HE染色實驗的基本步驟：

　　實驗準備

　　材料：小鼠結腸樣本、固定液(如10%中性緩沖福爾馬林)、梯度酒精(70%，80%，95%，100%)、二甲苯、石蠟、蘇木精染液、伊紅染液、載玻片、蓋玻片、封片劑。

　　設備：切片機、脫水機、透明化處理設備(用于二甲苯處理)、顯微鏡。

　　實驗步驟

　　1. 樣品采集與固定

　　采集：從實驗小鼠身上小心取出結腸部分，盡量保持組織完整。

　　固定：將取出的結腸迅速放入預冷的10%中性緩沖福爾馬林中固定，通常需要固定6至24小時。

　　2. 脫水與透明化

　　脫水：使用梯度酒精對固定的組織進行脫水處理，依次經過70%，80%，95%，100%的酒精溶液，每步大約30分鐘至1小時。

　　透明化：用二甲苯處理組織，使組織變得透明，便于后續包埋。一般需要更換兩次二甲苯，每次約1小時。

　　3. 包埋與切片

　　將透明化后的組織浸入融化的石蠟中，在特定溫度下包埋形成石蠟塊。

　　使用切片機將石蠟塊切成薄片(通常厚度為4-6微米)，并將其貼附在載玻片上。

　　4. HE染色

　　脫蠟：先用二甲苯去除切片上的石蠟，然后用梯度酒精(從100%到70%)逐步復水。

　　蘇木精染色：將切片放入蘇木精染液中染色5-10分鐘，根據實際效果調整時間。

　　分化：用水或1%鹽酸酒精溶液洗去多余的染料，改善對比度。

　　藍化：在弱堿性水中處理幾分鐘以增強細胞核的藍色。

　　伊紅染色：將切片放入伊紅染液中染色1-3分鐘，使細胞質和其他結構著色。

　　5. 脫水、透明化與封片

　　再次使用梯度酒精脫水，隨后用二甲苯透明化。

　　在載玻片上滴加適量封片劑，并輕輕放置蓋玻片，避免氣泡產生。

　　6. 顯微鏡觀察

　　使用光學顯微鏡觀察染色結果，記錄組織結構特征及任何可能存在的病理變化。

　　注意事項

　　固定時間和條件對于保持組織結構非常重要，過長或不適當的固定可能導致組織損傷。

　　染色過程中的時間和濃度需根據實際情況調整，確保z佳染色效果。

　　處理過程中要特別注意防止樣品干燥，以免影響染色質量。