行業(yè)信息
電鏡生物樣品制備的關(guān)鍵在于制出的樣品有必要忠實地反映其日子時的狀況,盡量防止“身后改動”和人為假象的發(fā)作,因而,選材這一步非常重要。選材要求如下:
1、冷:選材的器械和固定液均應(yīng)事前在4℃冰箱內(nèi)預冷。
2、快:選材時動作要快,所用的刀片要尖利,一般要求在臟器離體后1—2分鐘內(nèi)選材結(jié)束并放入2.5%戊二醛固定液內(nèi)于4℃冰箱內(nèi)保存。別的,應(yīng)防止對安排的揉捏和人為損害。
3、小:為了能讓安排充沛固定,有必要把安排切成盡可能小的塊,一般要求安排塊在1立方毫米左右或橫切面為1平方毫米的長條形,長度一般不超越3毫米,而皮膚、肌腱等安排較細密,選材應(yīng)在1立方毫米以內(nèi)。
4、準:由于電鏡標本要求小塊選材,為了電鏡調(diào)查的精確性,選材部位有必要要精確,并且,不同試驗組的標本盡量取在相同部位(如心肌安排取左心室,則一概取左心室),不然,將無法比較,進而影響調(diào)查結(jié)果,z終導致電鏡調(diào)查失利。
透射電鏡檢測各種安排選材辦法:
在一般情況下,腦安排先進行灌注固定(4%多聚甲醛溶液),待固定完結(jié)后應(yīng)立刻翻開顱骨,暴露出所要選材的方位,依據(jù)選材的要求以及試驗意圖割取相應(yīng)的部位,如研討腦神經(jīng)軸索、髓鞘以及神經(jīng)膠質(zhì)細胞,主張選材于腦安排白質(zhì)部分,此處有髓神經(jīng)纖維相對較多,膠質(zhì)細胞比較豐富;如要研討神經(jīng)元以及血腦屏障結(jié)構(gòu),主張選材于腦皮質(zhì)的灰質(zhì)部分,并且z好做定向包埋,以神經(jīng)元長軸方向(大約為腦安排的矢狀面)作為切面方向,這樣能夠很好地調(diào)查神經(jīng)元細胞核、軸突以及樹突結(jié)構(gòu)的改變,突觸以及毛細血管的結(jié)構(gòu)也比較簡單見到。
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