行業(yè)信息
首先我們要清楚的是,細胞增殖和細胞活性檢測兩者概念上還是有區(qū)別的。細胞增殖是指細胞在周期調(diào)控的因子下,通過DNA復(fù)制等反應(yīng),完成細胞分裂的過程,而細胞活性則是判斷體外培養(yǎng)細胞在某些條件下是否能正常生長的重要指標,那問題來了,細胞增殖與細胞活性檢測方法有哪些?流式能夠檢測嗎?
下面就由細胞實驗外包公司e測試來給大家說說吧!
一般實驗室常用的方法有以下幾種:
DNA合成檢測:利用BrdU/EdU等嵌入DNA的方式,通過后續(xù)染色或抗體標記來檢測DNA的合成,反映細胞增殖情況。BrdU/EdU檢測法,則是通過加入BrdU或EdU到細胞培養(yǎng)基中,讓其嵌入新合成的DNA,然后利用特定的抗體進行檢測,長沙科研實驗外包服務(wù)公司湘元生物實驗室提醒,這時候就會用到流式檢測儀,因為我們要通過流式細胞儀或熒光顯微鏡觀察標記的細胞,進行定量分析。
代謝活性物質(zhì)檢測:如MTT和CCK-8方法,基于細胞內(nèi)琥珀酸脫氫酶活性,將無色的底物轉(zhuǎn)化為有色產(chǎn)物,通過測定產(chǎn)物的量來評估細胞的活性和增殖能力。這個方法就簡單了,只需要將MTT或CCK-8溶液加入到細胞培養(yǎng)板中,一定時間后,測定溶解產(chǎn)物的吸光度,就能推算細胞活性或數(shù)量。
細胞增殖相關(guān)抗原檢測:通過特定的細胞周期相關(guān)蛋白,如Ki-67和PCNA的表達來評價細胞增殖。此類方法就是利用針對Ki-67或PCNA的抗體進行免疫熒光染色,觀察和計算標記陽性的細胞比例,以評估細胞的增殖活性。長沙科研實驗外包服務(wù)公司湘元生物實驗室提醒,在使用BrdU/EdU或Ki-67/PCNA檢測時,選擇高質(zhì)量和特異性強的抗體至關(guān)重要。
ATP濃度檢測:ATP作為細胞能量的直接來源,其濃度的變化可以反映細胞的活力和增殖狀態(tài)。所以我們就可以使用特定的生物發(fā)光試劑,如CellTiter-Glo,與細胞共同培養(yǎng),通過測定發(fā)光強度來反映細胞內(nèi)ATP的濃度,進而評價細胞的活力。當然了,為保證實驗結(jié)果的準確性,長沙科研實驗外包服務(wù)公司湘元生物實驗室提醒各位,一定要嚴格按照操作協(xié)議進行實驗,并對實驗條件進行標準化處理。
NEWS
新聞動態(tài)service
科研服務(wù)18537125967