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菌落總數測定是用來評估食品、水、土壤等樣品中細菌數量的一種微生物學方法。這種方法可以幫助評估樣品的衛(wèi)生狀況,以及判斷是否存在潛在的微生物污染風險。下面是菌落總數測定的一般步驟:
測定步驟
樣品準備:
根據樣品類型(如食品、水、土壤等),采取適量的樣品(一般為1g或1ml)。
對樣品進行適當稀釋,使用無菌生理鹽水或其他適合的稀釋液進行稀釋,以確保最終平板上的菌落數在可計數范圍內(通常為30-300個菌落)。
接種培養(yǎng)基:
使用平板涂布法、傾注法或膜過濾法將稀釋后的樣品接種到營養(yǎng)瓊脂或選擇性瓊脂平板上。
傾注法是在平板上鋪一層融化的瓊脂,然后將樣品與之混合;涂布法是將少量樣品涂布在已經固化的瓊脂表面;膜過濾法則是在過濾膜上收集樣品中的微生物,然后將膜轉移到瓊脂上。
培養(yǎng):
將接種后的平板翻轉(瓊脂面朝下),放置在適宜溫度的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。對于大多數細菌而言,37°C是一個常用的培養(yǎng)溫度,但某些情況下也可能采用其他溫度。
培養(yǎng)時間根據目標微生物的不同而異,通常為24小時,但某些情況下可能需要更長時間。
計數菌落:
觀察并計數平板上的菌落數。使用菌落計數器可以幫助提高效率和準確性。
根據平板上的菌落數量,計算出原樣品中的細菌總數。如果平板上的菌落數過多或過少,則需要重新調整稀釋倍數。
計算結果:
結果通常以CFU/g(每克樣品中的菌落形成單位)或CFU/ml(每毫升樣品中的菌落形成單位)表示。
結果應該記錄在實驗報告中,并與標準或歷史數據進行對比分析。
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