什么是超速離心法?

　　超速離心法(ultracentrifugation)是一種常用的技術手段，用于從細胞培養上清液、血漿、尿液等多種生物液體中分離出外泌體(exosomes)。外泌體是一類直徑大約在30-150納米之間的細胞外囊泡，它們能夠攜帶蛋白質、mRNA、miRNA等生物分子，并在細胞間傳遞這些信息，因此在外泌體研究中具有重要的生物學意義。

　　超速離心法提取外泌體的步驟如下：

　　預處理：首先，需要收集并預處理樣品。如果是細胞培養上清液，則需要通過低速離心(300-2000 g)去除細胞碎片和其他大顆粒;如果是血液樣品，則需要先通過凝固和低速離心分離出血清或血漿。

　　初次離心：接下來進行較高g值的離心(約2000-10000 g)，目的是進一步去除細胞殘骸、死細胞以及其他較大顆粒。

　　超速離心：隨后，將上一步得到的上清液轉移到超速離心管中，并進行長時間的高速離心(通常為100000 g，持續1-2小時)，這樣可以有效地沉淀出外泌體。此時，沉淀物中含有外泌體，而上清液則包含較小的囊泡和其他物質。

　　洗滌與再離心：為了純化外泌體，通常會使用PBS(磷酸鹽緩沖液)或其他適宜的緩沖液重新懸浮沉淀，并再次進行超速離心。這一過程有助于去除可能存在的污染物，提高外泌體的純度。

　　保存與分析：最后，將得到的外泌體沉淀重新溶解于適量的緩沖液中，并可以用于后續的實驗分析，如透射電子顯微鏡觀察、Nanoparticle Tracking Analysis (NTA) 測定粒徑分布、Western Blot 檢測標志蛋白等。