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原位雜交(In Situ Hybridization, ISH)是一種分子生物學技術,用于定位特定的核酸序列(DNA或RNA)在細胞或組織中的位置。通過將標記的單鏈核酸探針與目標核酸序列雜交,可以檢測特定基因的表達模式或病毒DNA的存在。這種方法廣泛應用于基礎研究、臨床診斷和藥物開發等多個領域。
原位雜交的基本步驟包括:
樣本準備:獲取組織或細胞樣本,并通過固定、脫水等步驟處理。
預雜交:對樣本進行預處理,以減少背景信號并提高雜交效率。
雜交:將標記的探針與樣本在適宜條件下進行雜交。
洗滌:去除未結合的探針,保留雜交復合物。
信號檢測:通過放射自顯影或酶促反應(如顯色或熒光)來檢測信號。
觀察與分析:使用光學顯微鏡或電子顯微鏡觀察樣本,并分析結果。
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